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流式细胞仪原理

2024-05-31m.verywind.com
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流式细胞仪的工作原理:

将经特异性荧光染料染色后的待测细胞放入样品管中,细胞在气体的压力下进入充满鞘液的流动室,在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱,通过激光器激发出散射光信号和荧光信号,由各自的激光检测器收集信号,再经光电倍增管(PMT)将信号放大,转变为电信号后由计算机系统进行分析.

流式细胞仪的检测范围: 

细胞结构:细胞大小,细胞颗粒度,DNA含量与细胞周期,RNA含量,蛋白质含量等等;

细胞功能: 细胞表面/胞浆/核的特异性抗原,细胞活性,细胞内/外的细胞因子,激素结合位点, 细胞受体,钙离子浓度,线粒体膜电位,等等



我简单说一下:\x0d\x0a1.首先,机器吸取细胞混悬液,射入由鞘液(一般都是磷酸盐缓冲液)。由于鞘液的流速大,所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央,一般是单个细胞排队的形式。\x0d\x0a\x0d\x0a2.然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色,被激光照射后,会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱\x0d\x0a\x0d\x0a3.根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果(比如抗原量,DNA量,等等)

  • 简述流式细胞仪的工作原理。
  • 答:流式细胞仪的工作原理:借鉴了荧光显微镜技术,将激发光改为激光,使具有更好的单色性;利用荧光染料与单克隆抗体技术,提高特异性与灵敏度;将固定的标本台改为流动的单细胞悬液,并用计算机进行信号的数据处理分析,能同时从一个细胞上获得多种参数资料。

  • 流式细胞仪的工作原理是什么
  • 答:有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色,被激光照射后,会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱\x0d\x0a\x0d\x0a3.根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果(比如抗原量,DNA量,等等)...

  • 流式细胞仪的原理和操作过程
  • 答:流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线,散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间...

  • 流式细胞仪原理
  • 答:流式细胞仪的工作原理:将经特异性荧光染料染色后的待测细胞放入样品管中,细胞在气体的压力下进入充满鞘液的流动室,在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱,通过激光器激发出散射光信号和荧光信号,由各自的激光检测器收集信号,再经光电倍增管(PMT)将信号放大,转变为电信号后由...

  • 流式细胞术的作用原理
  • 答:流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直...

  • 流式细胞仪原理
  • 答:1、流式细胞仪原理是参数测量原理。2、流式细胞仪(Flowcytometer)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它...

  • 流式细胞仪的原理是什么
  • 答:原理:根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果。1、将待测细胞染色后,制成单细胞悬液。2、用一定压力将待测样品压人流动室,同时不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流...

  • 请教流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理
  • 答:实验原理:流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及...

  • 流式细胞仪是怎么“看见”光的
  • 答:一般常规的流式细胞仪都是采用荧光激发和探测来检测信号的。基本的原理如下:荧光的产生。荧光素再受到光线(激发光,一般是激光)的照射后,会释放出波长较长的光线。发出的释放光通过光纤维传到检测区域。检测区域,不同的机器构造有所差异。基本的原理就是先通过各种滤镜的组合,来控制相应波长的光线...

  • 流式细胞仪计数法原理是什么
  • 答:流式细胞仪是通过激光对通过激光束的颗粒进行计数。当颗粒或者细胞通过激光束的时候,会对光线产生折射和反射。这个折射和反射的信号被探测器记录下来。每通过一个细胞,就会产生一个峰值,最后记录峰值的个数,就可以计数了

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